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絲腺特異表達hBPI23轉(zhuǎn)基因蠶的制作和表達分析

冉冬旭; 歐瑤; 劉榮鵬; 肖海梅; 徐漢福 家蠶基因組生物學(xué)國家重點實驗室; 西南大學(xué)生物技術(shù)學(xué)院; 重慶400715
  • 家蠶
  • 轉(zhuǎn)基因
  • 絲腺
  • 表達

摘要:殺菌/通透性增加蛋白(bactericidal/permeability-increasing protein,BPI)最先是在人類中性粒細胞中發(fā)現(xiàn)的一種陽離子抗菌蛋白,具有抗革蘭氏陰性菌和中和內(nèi)毒素等作用。研究表明,人BPI蛋白的N末端區(qū)(hBPI23,分子量為23kDa)具有天然BPI的全部生物活性。為探索利用BPI提高蠶絲抗菌性能的可行性,本研究首先構(gòu)建了以家蠶后部絲腺特異啟動子fibH為調(diào)控元件、hBPI23為靶標的轉(zhuǎn)基因表達載體,進而通過顯微注射和熒光篩選,制作獲得了攜帶hBPI23的轉(zhuǎn)基因系H-hBPI23。進一步檢測顯示:H-hBPI23的基因組整合位點位于家蠶第23號染色體上;在H-hBPI235齡幼蟲后部絲腺中,hBPI23的轉(zhuǎn)錄表達在整個5齡期呈上升趨勢,5齡第6d(吐絲前1d)達到表達高峰,其表達模式與內(nèi)源絲素蛋白基因類似。本研究為下一步開展H-hBPI23蠶絲的抗菌性能研究打下了初步基礎(chǔ)。

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