摘要：目的檢測乙酰膽堿酯酶(acetylcholinesterase,AChE)在小鼠皮膚切創(chuàng)愈合過程中的時序性表達(dá)及分布特征,探討其在創(chuàng)口愈合中的作用及其作為創(chuàng)口形成時間推斷參考指標(biāo)的可行性。方法45只C57BL/KsJ小鼠被隨機(jī)分為1個對照組和8個切創(chuàng)組。切創(chuàng)組建立皮膚切創(chuàng)模型,分別于傷后6h、12h、1d、3d、5d、7d、10d、14d提取皮膚創(chuàng)口樣本;對照組提取未切創(chuàng)的皮膚組織。應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色、雙重免疫熒光染色及Western印跡法檢測皮膚樣本中AChE的表達(dá)與分布。結(jié)果免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示,傷后6~12h,AChE主要表達(dá)于浸潤的多形核白細(xì)胞;傷后1~3d,大量浸潤的單個核細(xì)胞呈現(xiàn)AChE陽性染色;傷后5~14d,AChE陽性細(xì)胞以成纖維樣細(xì)胞為主。AChE的陽性細(xì)胞率于傷后6h開始增多,傷后1d達(dá)到峰值。雙重免疫熒光染色結(jié)果顯示,AChE陽性的單個核細(xì)胞和成纖維樣細(xì)胞主要為巨噬細(xì)胞和肌成纖維細(xì)胞。Western印跡法檢測結(jié)果顯示,各切創(chuàng)組AChE表達(dá)的相對表達(dá)水平均高于對照組,于傷后1d達(dá)到峰值,此后下降,于傷后7d達(dá)到第2個峰值。結(jié)論皮膚創(chuàng)口愈合期間AChE時序性表達(dá)于多形核白細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和肌成纖維細(xì)胞,提示其可能參與創(chuàng)口愈合的炎癥反應(yīng)和纖維性修復(fù)的調(diào)節(jié)。聯(lián)合使用多種方法檢測AChE的表達(dá),可以為創(chuàng)口形成時間的推斷提供參考依據(jù)。