首頁 > 期刊 > 自然科學(xué)與工程技術(shù) > 農(nóng)業(yè)科技 > 農(nóng)業(yè)綜合 > 廣東海洋大學(xué)學(xué)報(bào) > 半滑舌鰨gata5基因的克隆及表達(dá)分析 【正文】
摘要:【目的】研究半滑舌鰨(Cynoglossus semilaevis)gata5基因(csgata5)的序列特征及該基因在半滑舌鰨性腺分化、成熟過程中的表達(dá)模式?!痉椒ā客ㄟ^克隆獲得csgata5編碼區(qū)序列,利用熒光定量PCR(RT-qPCR)方法檢測csgata5 mRNA在不同類型性腺、胚胎和性腺發(fā)育中的表達(dá)模式,借助原位雜交技術(shù)定位csgata5 mRNA表達(dá)的細(xì)胞類型?!窘Y(jié)果】克隆獲得csgata5 cDNA序列1 777 bp,包含1 167 bp的編碼區(qū)(Coding sequence,CDS),262 bp的5′UTR和348 bp的3′UTR區(qū),預(yù)測csgata5編碼388個氨基酸殘基(aa),分子質(zhì)量為41.9 ku,等電點(diǎn)為8.90,在C端含有兩個典型的GATA鋅指結(jié)構(gòu)域;基因組分析顯示csgata5位于半滑舌鰨10號染色體上,包含7個外顯子和6個內(nèi)含子區(qū)。RT-qPCR分析顯示csgata5 mRNA在2齡雄魚和偽雄魚精巢中表達(dá)高于卵巢;csgata5m RNA主要定位在卵母細(xì)胞、精原細(xì)胞和精子中。胚胎發(fā)育過程中,csgata5m RNA表達(dá)在1細(xì)胞期至囊胚期呈下降趨勢,之后上升,至原腸胚期達(dá)到峰值,隨后降低并維持較低水平至孵化出膜。在精巢發(fā)育過程中,csgata5m RNA表達(dá)水平呈升高趨勢,在1齡達(dá)到檢測的峰值;在卵巢發(fā)育過程中,csgata5m RNA表達(dá)趨勢類似精巢,表達(dá)水平低于同期精巢?!窘Y(jié)論】csgata5參與半滑舌鰨原腸胚期的組織器官分化,具有促進(jìn)原始生殖細(xì)胞向雄性生殖細(xì)胞分化及雄性生殖細(xì)胞發(fā)育的作用。
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