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馬氏珠母貝TRACP基因的克隆及組織表達(dá)

鄭哲; 吳宣瑾; 焦鈺; 黃榮蓮; 杜曉東 廣東海洋大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院; 廣東湛江524088; 廣東省珍珠養(yǎng)殖與加工工程技術(shù)研究中心; 廣東湛江524088
  • 馬氏珠母貝
  • 抗酒石酸酸性磷酸酶
  • 基因克隆
  • 基因表達(dá)
  • 實(shí)時(shí)熒光定量pcr

摘要:【目的】克隆馬氏珠母貝(Pinctada martensii)抗酒石酸酸性磷酸酶(Tartrate resistant acid phosphatase,TRACP)基因,分析該基因在不同組織中的表達(dá)模式。【方法】用RACE技術(shù)克隆得馬氏珠母貝TRACP基因(PmTRACP),用實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析該基因在外套膜、閉殼肌、足、性腺、珍珠囊、肝胰腺和鰓中的表達(dá)。【結(jié)果與結(jié)論】PmTRACP基因長度為2 034 bp,開放式閱讀框972 bp,編碼323個(gè)氨基酸,5′UTR長度為27 bp,3′UTR長度為1 035 bp。預(yù)測(cè)PmTRACP分子質(zhì)量約為36.39 ku,理論等電點(diǎn)為5.97。該基因含有一個(gè)鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶樣磷酸酯酶結(jié)構(gòu)域。PmTRACP與其他物種TRACP的同源性為48%~65%,與長牡蠣(Crassostrea gigas)TRACP的同源性最高,同時(shí)D^32、D^70、Y^73、N^108、H^203、H^212、H^237、H^239等8個(gè)氨基酸活性位點(diǎn)和N^114糖基化位點(diǎn)在不同物種TRACP中高度保守。PmTRACP與長牡蠣TRACP的親緣關(guān)系最近。PmTRACP在馬氏珠母貝各個(gè)組織均有表達(dá),且在肝胰腺和珍珠囊中高表達(dá)。

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