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華支睪吸蟲富甘氨酸2a類抗原Cs4重組蛋白的免疫學特性與定位

程娜; 許學年; 張鴻滿; 周巖; 譚裕光; 包意芳; 張陸娟; 徐斌; 江河; 黎學銘; 馮正 中國疾病預防控制中心寄生蟲病預防控制所; 世界衛(wèi)生組織瘧疾、血吸蟲病和絲蟲病合作中心; 衛(wèi)生部寄生蟲病原與媒介生物學重點實驗室; 上海200025; 廣西壯族自治區(qū)疾病預防控制中心; 南寧530028
  • 華支睪吸蟲
  • 富甘氨酸2a抗原
  • 抗原性
  • 組織定位
  • 分泌蛋白

摘要:目的對華支睪吸蟲富甘氨酸2a(glycine rich antigen 2a,GRA2a)類抗原Cs4重組蛋白(rCs4)進行免疫學特性分析,并對GRA2a類抗原進行組織定位。方法使用蛋白質(zhì)印跡(Western印跡)分析rCs4與華支睪吸蟲病患者混合血清的免疫反應性,并分析GRA2a類抗原的分泌性。應用ELISA法檢測rCs4免疫小鼠血清中抗rCs4特異性IgG水平,并動態(tài)檢測華支睪吸蟲感染兔0~44周的血清中抗rCs4特異性IgG水平。通過免疫熒光實驗(immunofluorescence assay,IFA)對華支睪吸蟲GRA2a類抗原進行組織定位。結(jié)果純化的rCs4可被華支睪吸蟲病患者混合血清識別。rCs4單抗(mAbCs4—31)與華支睪吸蟲排泄分泌抗原和可溶性抗原在相對分子質(zhì)量(Mr)26000與55000之間分別有13、15個反應條帶,均呈階梯狀分布。ELISA檢測rCs4免疫小鼠抗rcs4和ESA的IgG效價均達1:64000,感染兔的抗rCs4特異性抗體平均水平自感染第4周開始上升,于第6周達到高峰,此后逐步遞減,至第20周已呈較低水平。IFA檢測發(fā)現(xiàn)GRA2a類抗原定位于華支睪吸蟲成蟲的表皮。結(jié)論Cs4蛋白是華支睪吸蟲在感染早期的分泌型蛋白,具較好的抗原性。GRA2a類抗原定位于華支睪吸蟲成蟲表皮。

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國際醫(yī)學寄生蟲病

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主管單位:衛(wèi)生部;主辦單位:中華醫(yī)學會;中國疾病預防與控制中心寄生蟲病預防控制所

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