摘要：目的制備抗CMV早晚期抗原單克隆抗體并在病毒培養(yǎng)物鑒定中初步應(yīng)用。方法CMV感染MRC-5細胞24h、48h和72h后甲醛滅活的可溶性抗原免疫BALB／e小鼠，小鼠脾細胞與骨髓瘤細胞NS-1進行融合。酶免法篩查陽性雜交瘤并有限性稀釋法進行克隆。免疫熒光及印跡對篩選后的克隆進行鑒定，最終獲得的雜交瘤制備腹水并使用ProteinG進行純化。純化后單抗應(yīng)用于CAP室間質(zhì)評標本以及臨床標本CMV培養(yǎng)物的鑒定。結(jié)果3只小鼠脾細胞與骨髓瘤細胞融合后初步篩查出約110株陽性克隆。剔除與其它抗原有交叉反應(yīng)、抗體效價低、非全覆蓋早晚期抗原的克隆最終獲得抗CMV單抗雜交瘤1株，即2385-1。免疫熒光顯示2385-1株單抗與CklV感染后3h-120h的MRC-5細胞均反應(yīng)，即覆蓋即刻、早期和晚期抗原。免疫印跡試驗顯示2385-1株單抗與CMV抗原25KD-50KD之間的5個蛋白條帶結(jié)合。2385-1株單抗免疫球蛋白亞型為IgGl。ProteinG純化腹水后的單抗效價≥1：12800。純化單抗染色鑒定6份室間質(zhì)評及10份臨床標本CMV培養(yǎng)物全部符合。結(jié)論初步應(yīng)用顯示制備的抗CMV早晚期抗原單克隆抗體性能良好。