摘要：為了評價牛壞死桿菌外膜蛋白43K OMP 的免疫原性,試驗利用大腸桿菌原核表達系統(tǒng)對牛壞死桿菌43K OMP基因進行表達,純化目的蛋白免疫兔,制備牛壞死桿菌43K OMP多克隆抗體,并對其進行鑒定。對基因序列進行預測分析后,針對大腸桿菌稀有密碼子優(yōu)化合成該基因序列,克隆至pET-32a 原核表達載體上,經(jīng)異丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)誘導表達及鎳柱進行純化,獲得重組蛋白大小約為59 ku。重組蛋白經(jīng)Western blotting 鑒定后免疫兔,制備多克隆抗體。Western blot 檢測牛壞死桿菌43K OMP多克隆抗體與43K OMP重組蛋白具有很好的免疫原性。研究成功制備了牛壞死桿菌43K OMP 多克隆抗體,為以43K OMP蛋白為基礎的疫苗研究奠定基礎。