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調控表達LacI蛋白的豬霍亂沙門氏桿菌C500Δasd株的構建

許可; 劉晶; 高興; 胡譯文; 楊桂連; 王春鳳; 姜延龍 吉林農業(yè)大學動物科學技術學院/吉林省動物微生態(tài)制劑工程研究中心/動物生產與產品質量安全教育部重點實驗室; 長春130118
  • 豬霍亂沙門氏桿菌c500株
  • arac
  • pbad啟動子
  • laci蛋白表達

摘要:為了構建具有asd基因缺失和LacI蛋白表達調控的豬霍亂沙門氏桿菌C500株,試驗以豬霍亂沙門氏桿菌C500株為載體,對其基因組進行改造,使沙門氏桿菌asd基因缺失,隨后將araC PBADLacI序列置于其中,構建包含araC PBAD-LacI基因表達框的豬霍亂沙門氏桿菌C500Δasd基因突變株以及包含Ptrc啟動子的EGFP表達質粒pYA4514-EGFP,并驗證是否有LacI蛋白表達。結果表明:試驗成功構建出包含araC PBAD-LacI基因表達框的豬霍亂沙門氏桿菌C500Δasd基因突變株,以及包含Ptrc啟動子的EGFP表達質粒pYA4514-EGFP;Western-blot檢測驗證了突變菌在阿拉伯糖存在的條件下可大量表達LacI蛋白,而當pYA4514-EGFP質粒上的Ptrc啟動子受到抑制時,EGFP蛋白不表達;用IPTG誘導后可以消除LacI對Ptrc啟動子的抑制作用,EGFP蛋白表達。說明試驗成功構建了調控表達LacI蛋白的豬霍亂沙門氏桿菌C500Δasd基因突變株。

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黑龍江畜牧獸醫(yī)

  • 預計1-3個月 預計審稿周期
  • 0.25 影響因子
  • 生物 快捷分類
  • 半月刊 出版周期

主管單位:黑龍江省農業(yè)科學院;主辦單位:黑龍江省農業(yè)科學院

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