摘要：為從細胞水平上揭示刺葡萄3-O-類黃酮葡萄糖基轉移酶(UFGT)基因調控花青素合成的功能,以刺葡萄愈傷組織為試驗材料,根據(jù)刺葡萄愈傷組織轉錄組UFGT序列片段,利用RT-PCR結合RACE技術克隆得到VdUFGT基因,并對其進行生物信息學和表達特性分析。結果表明,VdUFGT基因cDNA和DNA開放閱讀框(ORF)分別為1 371 bp和1 448 bp,包含2個外顯子和1個內含子,編碼456個氨基酸,為帶負電荷的不穩(wěn)定的親水性蛋白,具有一個UDPGT結構域,是UDPGT超家族成員,包含UDP-黃酮糖基轉移酶特征區(qū)域。由UFGT同源基因編碼蛋白所構建的系統(tǒng)發(fā)育樹,與植物進化的關系相一致,6個葡萄屬植物聚為一支。RT-qPCR分析表明,刺葡萄紅色愈傷組織VdUFGT轉錄水平極顯著高于白色愈傷組織,培養(yǎng)25 d的2個細胞培養(yǎng)物差異可達79倍;在刺葡萄愈傷組織連續(xù)培養(yǎng)過程中,紅色愈傷組織中Vd UFGT轉錄水平變化幅度較大,在愈傷組織快速生長中期和衰老初期分別出現(xiàn)峰值,而刺葡萄白色愈傷組織VdUFGT轉錄水平與紅色愈傷組織相比變化幅度不大,且始終維持在一個較低的水平。說明VdUFGT對刺葡萄紅色愈傷組織細胞培養(yǎng)物中的花青素生物合成有重要的調控作用,這種調控作用主要發(fā)生在刺葡萄愈傷組織細胞快速生長中期和細胞衰老初期。本研究結果為進一步闡明VdUFGT調控刺葡萄細胞花青素合成的機制奠定了理論基礎。