摘要：目的:構(gòu)建人血管緊張素Ⅱ2型受體(hAT2R)過表達(dá)穩(wěn)定細(xì)胞系,探討AT2R激動劑Compound 21等對前列腺癌細(xì)胞的作用及機制.方法:構(gòu)建含hAT2R基因的慢病毒表達(dá)載體pLV-CMV-hAT2R-IRES-eGFP并包裝成慢病毒.將重組慢病毒載體pLV-CMV-IRES-eGFP-hAT2R感染前列腺癌細(xì)胞,并利用流式細(xì)胞術(shù)篩選出單克隆細(xì)胞株,RT-PCR及Western blot方法檢測重組細(xì)胞系中hAT2R表達(dá)水平,使用AT2R激動劑CGP42112檢測受體功能.結(jié)果:重組慢病毒載體感染PC-3、DU145前列腺癌細(xì)胞24 h后均能觀察到eGFP表達(dá),用流式細(xì)胞術(shù)分別篩選出單克隆細(xì)胞株,RT-PCR及Western blot檢測結(jié)果顯示目的基因hAT2R在兩株重組細(xì)胞系中表達(dá)顯著升高,CGP42112處理24 h后,重組細(xì)胞系細(xì)胞活力較正常PC-3、DU145細(xì)胞顯著降低.結(jié)論:成功構(gòu)建hAT2R過表達(dá)穩(wěn)定細(xì)胞系.