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骨髓間充質(zhì)細(xì)胞與多系分化持續(xù)應(yīng)激細(xì)胞的蛋白質(zhì)譜分析比較

趙雅玉; 費(fèi)穎; 季煜華; 王曉冬; 陳罡 南通大學(xué)江蘇省神經(jīng)再生重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室; 江蘇226001; 南通大學(xué)醫(yī)學(xué)院組織學(xué)與胚胎學(xué)系; 江蘇226001
  • 骨髓間充質(zhì)細(xì)胞
  • 多系分化持續(xù)應(yīng)激細(xì)胞
  • 蛋白質(zhì)譜分析

摘要:目的:比較骨髓間充質(zhì)細(xì)胞(hBMSCs)和多系分化持續(xù)應(yīng)激細(xì)胞(Muse細(xì)胞)蛋白表達(dá)的差異。方法:通過密度梯度離心和差速貼壁法從健康人骨髓中分離得到hBMSCs,流式細(xì)胞儀檢測其中SSEA-3/CD105雙陽性細(xì)胞;利用長時間胰酶孵育法從hBMSCs中分離得到Muse細(xì)胞,利用qPCR技術(shù)在mRNA水平檢測多能干細(xì)胞標(biāo)記物的表達(dá)情況;提取hBMSCs和Muse細(xì)胞蛋白,應(yīng)用iTRAQ標(biāo)記結(jié)合online 2D LC/MS/MS蛋白組學(xué)技術(shù)定量評估蛋白質(zhì)表達(dá)譜。結(jié)果:hBMSCs中SSEA-3和CD105雙陽性細(xì)胞占0.51%;長時間胰酶孵育法可以成功分離出Muse細(xì)胞,懸浮可呈球狀生長,且SSEA-3、Sox-2、Oct-4表達(dá)均高于hBMSCs;蛋白質(zhì)譜共檢測4 377個蛋白,相對于hBMSCs,Muse細(xì)胞有27個上調(diào)蛋白和68個下調(diào)蛋白。結(jié)論:hBMSCs和Muse細(xì)胞蛋白表達(dá)基本相同,僅有95種蛋白存在差異。

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