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阻斷CXC趨化因子10在神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞氧糖剝奪模型中對(duì)toll樣受體4/核因子κB通路調(diào)節(jié)炎癥影響

仇靖; 李巖松; 王敏; 姚奔馳; 鄭軍 北部戰(zhàn)區(qū)總醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科; 遼寧沈陽(yáng)110016; 北部戰(zhàn)區(qū)空軍醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科; 遼寧沈陽(yáng)110042
  • cxc趨化因子10
  • 神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞
  • 氧糖剝奪
  • toll樣受體4

摘要:目的探討阻斷CXC趨化因子10(CXCL10)在神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞(N2a)氧糖剝奪(OGD)模型中對(duì)toll樣受體4(TLR4)/核因子κB(NF-κB)通路調(diào)節(jié)炎癥的影響。方法應(yīng)用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法將CXCL10基因轉(zhuǎn)染至小鼠神經(jīng)瘤母細(xì)胞,采用實(shí)時(shí)定量熒光PCR(RT-PCR)與Western blot法檢測(cè)轉(zhuǎn)染后CXCL10的基因和蛋白表達(dá)水平;實(shí)驗(yàn)分為未傳染組、OGD/R組、OGD/R+NC組、OGD/R+CXCL10 siRNA組、OGD/R+CXCL10siRNA+LPS組、OGD/R+TAK242組,細(xì)胞轉(zhuǎn)染24 h后建立OGD模型,3 h后予以復(fù)氧;復(fù)氧24 h后,RT-PCR法檢測(cè)腫瘤壞死因子-α、白細(xì)胞介素-1β、白細(xì)胞介素-2基因表達(dá)水平,應(yīng)用Western-blot法檢測(cè)細(xì)胞CXCL10、TLR4、NF-κB p65、p-NF-κBp65、cleaved-caspase3蛋白表達(dá)水平。結(jié)果 RT-PCR與Western blot結(jié)果顯示,OGD損傷細(xì)胞后,TLR4被激活,進(jìn)而激活NF-κB信號(hào)通路,導(dǎo)致炎癥因子表達(dá)。CXCL10基因沉默降低了相關(guān)炎癥因子的表達(dá),并抑制了N2a細(xì)胞的TLR4、P-NF-κBp65和caspase3的蛋白表達(dá)。沉默CXCL10基因加入TLR4激動(dòng)劑可以促進(jìn)炎癥因子表達(dá)及相關(guān)信號(hào)通路的蛋白表達(dá)。結(jié)論 CXCL10對(duì)OGD損傷有保護(hù)作用,可能通過(guò)TLR4/NF-κB信號(hào)通路實(shí)現(xiàn)。

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