摘要：目的構(gòu)建長鏈非編碼RNA-GAS5(lncRNA-GAS5)過表達(dá)及干擾慢病毒載體,并在人滋養(yǎng)細(xì)胞中進(jìn)行轉(zhuǎn)染效率鑒定。方法獲取lncRNA-GAS5基因序列,合成重組lncRNA-GAS5全基因序列,同時(shí)設(shè)計(jì)并合成3條lncRNA-GAS5 RNAi序列,構(gòu)建過表達(dá)及干擾慢病毒載體,轉(zhuǎn)染至293T細(xì)胞包裝病毒并測定其滴度,轉(zhuǎn)染人滋養(yǎng)細(xì)胞株HTR-8/SVneo后,使用熒光顯微鏡觀察熒光表達(dá)情況,采用實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)法檢測lncRNA-GAS5表達(dá),并篩選出最佳干擾效率的表達(dá)載體。結(jié)果過表達(dá)載體感染細(xì)胞后,其表達(dá)量提高了2.12倍;干擾載體感染細(xì)胞后,其表達(dá)量降低了67.3%。結(jié)論本實(shí)驗(yàn)成功構(gòu)建了lncRNA-GAS5慢病毒過表達(dá)和干擾載體,可為后續(xù)進(jìn)一步研究提供基礎(chǔ)。