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谷氨酸棒桿菌ATCC 14067中L-精氨酸合成途徑關(guān)鍵酶的過表達對L-精氨酸合成的影響

謝珊; 蔡友華; 李露 華南理工大學(xué)生物科學(xué)與工程學(xué)院; 廣東省發(fā)酵與酶工程重點實驗室; 廣東省生物酶與工業(yè)綠色加工工程技術(shù)研究中心; 廣州510006; 廣東肇慶星湖生物科技股份有限公司; 肇慶526040
  • 谷氨酸棒桿菌
  • 串聯(lián)表達

摘要:谷氨酸棒桿菌中與精氨酸合成相關(guān)的酶主要是由2個操縱子基因簇argCJBDFR和argGH編碼合成。此外,在L-精氨酸合成途徑的前體物谷氨酸和氨甲酰磷酸的合成中,由gdh、icd、gltA、carAB4個基因分別編碼的谷氨酸脫氫酶、異檸檬酸脫氫酶、檸檬酸合酶、氨甲酰磷酸合成酶是谷氨酸和氨甲酰磷酸合成的關(guān)鍵酶。研究以解除了L-精氨酸的別構(gòu)抑制作用的谷氨酸棒桿菌為出發(fā)菌株,利用3種不同抗性的表達質(zhì)粒分別對這些關(guān)鍵酶的編碼基因進行串聯(lián)共表達。在最終得到的13個菌株中,L-精氨酸產(chǎn)量最高的菌株是出發(fā)菌株L-精氨酸產(chǎn)量的6.23倍,這表明串聯(lián)過表達菌株L-精氨酸合成途徑中,不同節(jié)點關(guān)鍵酶的編碼基因可以更有效地提高菌株中L-精氨酸的產(chǎn)量,為進一步改造L-精氨酸的合成途徑、優(yōu)化L-精氨酸的產(chǎn)量奠定了基礎(chǔ)。

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