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青霉素結合蛋白PBP 2b基因的克隆與表達

覃鴻妮 俞蘇敏 蘇州工業(yè)園區(qū)服務外包職業(yè)學院 江蘇蘇州215123
  • 青霉素結合蛋白
  • pbp
  • 2b基因
  • 克隆
  • 表達

摘要:在已知基因序列但缺乏DNA模版的情況下,人工設計合成多條引物,采用重疊PCR技術體外人工合成編碼青霉素結合蛋白的基因PBP 2b.將合成的PBP 2b基因連接到載體pet-30a上,并將重組表達載體(pet-30a)/PBP2b-tiger轉入T7 expression E.coli表達菌株中.重組工程菌經IPTG誘導,用SDS-PAGE鑒定,發(fā)現(xiàn)青霉素結合蛋白(PBPs)成功表達.本研究構建了高表達青霉素結合蛋白(PBPs)的原核表達系統(tǒng),制備出青霉素結合蛋白,從而為進一步從基因水平認識青霉素結合蛋白(PBPs)奠定基礎,為了解細菌耐藥的機制提供依據.

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