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水稻硝態(tài)氮響應(yīng)的酵母雙雜交文庫(kù)的構(gòu)建與分析

洪廣成; 陳倩; 劉石鋒; 張漢馬; 秦小健 重慶師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院植物環(huán)境適應(yīng)分子生物學(xué)市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室; 重慶401331
  • 水稻
  • 氮吸收與利用
  • 酵母雙雜交
  • 文庫(kù)構(gòu)建

摘要:酵母雙雜交是在真核生物酵母細(xì)胞體內(nèi)研究蛋白質(zhì)之間相互作用的一種高效分子生物學(xué)技術(shù)。為了研究水稻氮吸收與利用的分子調(diào)控機(jī)理,以硝態(tài)氮(5 mmol/L KNO3)誘導(dǎo)處理的水稻 9311幼苗為材料,構(gòu)建水稻在高氮響應(yīng)條件下的酵母雙雜交cDNA文庫(kù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,構(gòu)建的氮響應(yīng)文庫(kù)滴度為1.7×10^8 cfu/mL,文庫(kù)的重組率為95%,插入片段大小在 500~1500 bp之間。從文庫(kù)中隨機(jī)挑選10個(gè)單克隆,測(cè)序后通過(guò)NCBI比對(duì)分析結(jié)果顯示9個(gè)克隆可以從水稻基因庫(kù)中找到對(duì)應(yīng)序列。文庫(kù)的構(gòu)建將為水稻氮素吸收與利用的分子調(diào)控機(jī)理研究提供幫助。

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生物學(xué)

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  • 0.83 影響因子
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