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新生Wistar大鼠心肌細(xì)胞的分離培養(yǎng)與鑒定

陳克研 王洋 王承利 張賀 梁娟 孫倩 蘇朋 沈陽軍區(qū)總醫(yī)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科 110840
  • 大鼠
  • 新生
  • 心肌細(xì)胞
  • 分離培養(yǎng)

摘要:本實(shí)驗(yàn)取新生24h內(nèi)的Wistar大鼠心肌組織,無菌剪碎后采用胰酶消化法分離細(xì)胞,用含20%胎牛血清的DMEM/F12培養(yǎng)基培養(yǎng),逐日在倒置相差顯微鏡下觀察。結(jié)果于培養(yǎng)后48h即可觀察到部分細(xì)胞搏動(dòng);72h后,細(xì)胞逐漸展開,搏動(dòng)頻率在60-70次/min,從而初步確立培養(yǎng)的細(xì)胞為心肌細(xì)胞;進(jìn)一步采用心肌細(xì)胞特異性蛋白(cTnT)抗體和儀肌動(dòng)蛋白(d—actin)單克隆抗體分別對(duì)培養(yǎng)的心肌細(xì)胞進(jìn)行免疫熒光及免疫組織化學(xué)鑒定,結(jié)果均呈陽性。

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