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原核與真核生物宿主DNA殘留檢測方法的建立與比較

周飛燕; 孔雯雯; 符美娟 廣州白云山拜迪生物醫(yī)藥有限公司; 廣東廣州511495
  • 原核生物
  • 真核生物
  • dna殘留
  • 雜交

摘要:目的建立原核生物[大腸桿菌(E.coli)]和真核生物(酵母菌和CHO細(xì)胞)宿主DNA殘留的檢測方法,并比較檢測方法的靈敏度。方法以E.coli、酵母菌和CHO細(xì)胞宿主DNA為模板,制備地高辛標(biāo)記的探針。將探針與宿主DNA進(jìn)行雜交后采用底物顯色法顯色,建立3種生物宿主DNA殘留檢測方法,并比較溫度對檢測方法靈敏度的影響。結(jié)果建立了E.coli、酵母菌和CHO細(xì)胞宿主DNA的檢測方法,靈敏度高達(dá)10 pg;同一條件下真核生物宿主DNA殘留檢測方法的靈敏度要高于原核生物。結(jié)論該檢測方法具有靈敏度高、準(zhǔn)確性好、操作簡便等優(yōu)勢,可用于E.coli、酵母菌和CHO細(xì)胞宿主DNA殘留的檢測及質(zhì)量控制。

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現(xiàn)代食品與藥品

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