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透射電鏡樣本制備過程中前處理溶液溫度對心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的影響

王萌; 阮夢然; 李婷; 董紅燕 徐州醫(yī)科大學(xué)形態(tài)學(xué)科研實(shí)驗(yàn)中心; 江蘇徐州221004; 沐陽縣人民醫(yī)院兒科; 江蘇沐陽223600
  • 透射電鏡
  • 超微結(jié)構(gòu)
  • 心肌細(xì)胞
  • 樣本制備
  • 溫度

摘要:目的觀察透射電鏡樣本制備過程中前處理溶液溫度對心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的影響,以確定最佳實(shí)驗(yàn)溫度。方法將15只健康C57/BL6小鼠隨機(jī)分成3組,每組5只。腹腔麻醉后分別切取小鼠心肌組織,行透射電鏡生物樣本常規(guī)制備程序,Ⅰ組樣本漂洗、后固定和脫水程序均在4℃進(jìn)行,組在20℃進(jìn)行,Ⅲ組在37℃進(jìn)行。結(jié)果透射電鏡鏡下觀察顯示,Ⅰ組肌絲、線粒體、肌膜下小泡及Z線的超微結(jié)構(gòu)保存較好,樣本背景清晰整潔;Ⅱ組肌絲整齊,線粒體和肌膜下小泡少部分膜結(jié)構(gòu)溶解,Z線附著少量黑顆粒,結(jié)構(gòu)間隙有黑顆粒污染;Ⅲ組結(jié)構(gòu)保存較差,肌絲模糊,線粒體部分膜結(jié)構(gòu)溶解,肌膜下小泡膜結(jié)構(gòu)溶解且結(jié)構(gòu)不清晰,Z線附著黑顆粒,結(jié)構(gòu)間隙黑顆粒污染嚴(yán)重。結(jié)論透射電鏡樣本制備過程中心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的保存受前處理溶液溫度的影響,最佳實(shí)驗(yàn)溫度為4℃。

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