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日本結(jié)縷草ZjNAC1的克隆、轉(zhuǎn)錄激活活性、亞細胞定位及表達分析

滕珂; 姜紅巖; 張蕊; 檀鵬輝; 岳躍森; 范希峰; 武菊英 北京草業(yè)與環(huán)境研究發(fā)展中心; 北京100097; 北京林業(yè)大學(xué)草坪研究所; 北京100083
  • 日本結(jié)縷草
  • nac轉(zhuǎn)錄因子
  • 轉(zhuǎn)錄激活
  • 亞細胞定位
  • 表達分析

摘要:采用RACE技術(shù)從日本結(jié)縷草中克隆得到ZjNAC1轉(zhuǎn)錄因子(GenBank No. MH428376),其開放閱讀框為945bp,編碼314個氨基酸。ZjNAC1編碼的蛋白在N端有1個典型的NAM保守結(jié)構(gòu)域,屬于NAC轉(zhuǎn)錄因子家族。通過染色體步移的方法,獲得ZjNAC1基因ATG上游1635bp序列,分析發(fā)現(xiàn)其包含響應(yīng)脫落酸(ABA)、茉莉酸甲酯(MeJA)及逆境脅迫的作用元件。構(gòu)建pGBKT7-ZjNAC1載體,轉(zhuǎn)化Y2HGold酵母感受態(tài)細胞,發(fā)現(xiàn)ZjNAC1具有轉(zhuǎn)錄激活活性。農(nóng)桿菌介導(dǎo)的35S-ZjNAC1-YFP載體注射本生煙草葉片瞬時表達結(jié)果顯示,ZjNAC1定位于細胞核。實時熒光定量結(jié)果表明,ZjNAC1在日本結(jié)縷草根中表達量最高;此外,ZjNAC1的表達受10μmol/L MeJA和20%PEG4000處理的誘導(dǎo),但受200μmol/L乙烯(ET)、10μmol/L ABA和300mmol/L NaCl處理的抑制。

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中國草地學(xué)報

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