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斯氏按蚊MyD88基因生物信息學(xué)分析及其在抗約氏瘧原蟲感染中的作用

王盼; 于莎莎; 秦杰; 吳振東; 劉婷婷; 王靜; 王英 陸軍軍醫(yī)大學(xué)軍事預(yù)防醫(yī)學(xué)系熱帶醫(yī)學(xué)教研室; 重慶400038; 陸軍軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院學(xué)員一大隊(duì)2隊(duì); 重慶400038
  • 斯氏按蚊
  • 約氏瘧原蟲
  • myd88基因
  • 生物信息學(xué)
  • 天然免疫

摘要:目的對斯氏按蚊MyD88基因進(jìn)行生物信息學(xué)分析,并研究其在抗約氏瘧原蟲感染中的作用。方法首先,通過VectorBase數(shù)據(jù)庫獲取斯氏按蚊MyD88基因cDNA序列,并利用VectorNTI、DNAMAN等軟件對MyD88基因cDNA序列進(jìn)行生物信息學(xué)分析。然后,根據(jù)MyD88的cDNA序列設(shè)計(jì)Real-time PCR引物,提取斯氏按蚊總RNA,通過反轉(zhuǎn)錄合成cDNA,利用Real-time PCR方法檢測MyD88基因在蚊各個(gè)生活史階段轉(zhuǎn)錄水平情況及其在約氏瘧原蟲感染后的轉(zhuǎn)錄水平變化。結(jié)果斯氏按蚊MyD88基因位于斯氏按蚊KB664619號(hào)染色體155 163~158 066 bp的反義鏈上,包含兩個(gè)外顯子,其c DNA全長1 383 bp,編碼460個(gè)氨基酸。系統(tǒng)發(fā)育樹結(jié)果顯示,斯氏按蚊與大劣按蚊和岡比亞按蚊系統(tǒng)發(fā)育的距離近,其氨基酸序列同源性達(dá)79%。對斯氏按蚊各時(shí)期MyD88基因轉(zhuǎn)錄水平的研究結(jié)果顯示,吸食正常血和感染血均能夠上調(diào)MyD88的轉(zhuǎn)錄,吸血后3 d和5 d吸感染血組MyD88基因轉(zhuǎn)錄水平上調(diào)明顯,顯著高于正常血組和未吸血組。結(jié)論本研究證實(shí)了Toll信號(hào)通路中的MyD88基因在蚊抗瘧原蟲感染的天然免疫中發(fā)揮了重要作用,在感染后3 d時(shí)作用明顯。

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