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豬瘟病毒實(shí)時(shí)熒光核酸恒溫?cái)U(kuò)增檢測(cè)方法的建立與評(píng)價(jià)

孫潔; 楊春華; 史衛(wèi)軍; 楊俊興; 程思; 王瑞菁; 張常娥; 林彥星; 黃超華; 花群義 中華人民共和國(guó)深圳海關(guān)動(dòng)植物檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心; 廣東深圳518001; 中華人民共和國(guó)南昌海關(guān); 江西南昌330002; 上海仁度生物科技有限公司; 上海201201
  • 豬瘟病毒
  • 實(shí)時(shí)熒光核酸恒溫?cái)U(kuò)增
  • 快速檢測(cè)

摘要:為了建立豬瘟病毒(CSFV)實(shí)時(shí)熒光核酸恒溫?cái)U(kuò)增檢測(cè)方法,采用特異性磁珠RNA捕獲探針從組織、血液、排泄物和培養(yǎng)物等樣本中提取病毒核酸,進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光恒溫?cái)U(kuò)增檢測(cè),與傳統(tǒng)的實(shí)時(shí)熒光檢測(cè)技術(shù)相比,本試驗(yàn)建立的豬瘟病毒SAT檢測(cè)方法操作簡(jiǎn)便,耗時(shí)短,整個(gè)擴(kuò)增過程在42℃恒溫下完成,沒有頻繁的升降溫過程,縮短了檢測(cè)時(shí)間,50 min內(nèi)可完成檢測(cè)。該方法特異性強(qiáng),對(duì)多種相關(guān)豬病病毒進(jìn)行檢測(cè)無交叉反應(yīng)。該方法靈敏度高,與實(shí)時(shí)熒光PCR相比均可達(dá)到100個(gè)拷貝數(shù)。該方法適用于豬瘟病毒的快速檢測(cè)和監(jiān)測(cè)。

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