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旋毛蟲Ts-Sp-7蛋白的表達(dá)純化及其多克隆抗體的制備

張勝蘭; 劉琰; 李巖松; 劉曉雷; 白雪; 唐斌; 王學(xué)林; 劉明遠(yuǎn); 周玉 吉林大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院/人獸共患病研究教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室; 吉林長春130062; 長江大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院; 湖北荊州434023
  • 旋毛蟲
  • 原核表達(dá)
  • 間接免疫熒光

摘要:為給旋毛蟲病的診斷及疫苗研制提供備選抗原,對本實(shí)驗(yàn)室獲得的旋毛蟲Ts-Sp-7基因(GenBank登錄號EU263332.1)進(jìn)行PCR擴(kuò)增,構(gòu)建原核表達(dá)載體,進(jìn)行表達(dá)純化,Western-blot分析。制備多克隆抗體進(jìn)行間接免疫熒光分析。通過PCR擴(kuò)增出1372 bp的Ts-Sp-7基因。SDS-PAGE結(jié)果顯示,該蛋白大小為46 ku左右,與理論分子質(zhì)量一致。Western-blot結(jié)果顯示,該目的蛋白與10000條/頭感染劑量不同感染時(shí)間的豬陽性血清均呈現(xiàn)特異性條帶。制備的多克隆抗體效價(jià)為1∶350000。Ts-Sp-7多克隆抗體的間接免疫熒光鑒定結(jié)果顯示,Ts-Sp-7蛋白在旋毛蟲肌幼蟲期存在于蟲體表面。

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中國獸醫(yī)科學(xué)

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