摘要：目的研究黏多糖貯積癥ⅣA型（mucopolysaccharidosis type ⅣA，MPSⅣA）患者發(fā)病的分子遺傳學(xué)機(jī)制，揭示其基因型與表現(xiàn)型的相互關(guān)系，為產(chǎn)前基因診斷等創(chuàng)造必要的前提條件。方法采用尿糖胺聚糖（glycosaminoglycans，GAGs）定性檢測(cè)法對(duì)疑似MPSIVA型的先證者進(jìn)行初診，然后采用PCR及擴(kuò)增產(chǎn)物直接測(cè)序法對(duì)先證者及其家庭成員進(jìn)行突變檢測(cè)。在檢出GALNS基因c．1567T〉G新突變后，先后建立XspI酶切鑒定法和擴(kuò)增阻礙突變系統(tǒng)（amplification refractory mutation system，ARMS）快速特異鑒定法，對(duì)隨機(jī)采集的110名正常對(duì)照與先證者及其家庭成員的GALNS基因第14外顯子進(jìn)行序列分析，同時(shí)采用生物信息學(xué)方法對(duì)蛋白質(zhì)二級(jí)、三級(jí)結(jié)構(gòu)進(jìn)行預(yù)測(cè)，以及直接測(cè)定患兒GALNS酶活性的方法，對(duì)該新突變進(jìn)行致病性鑒定。結(jié)果先證者尿檢呈弱陽(yáng)性GAGs（±），其GALNS基因第14外顯子內(nèi)存在雜合的c．1567T〉G終止密碼突變，第4外顯子存在雜合的c．374C〉T錯(cuò)義突變，為兩種突變的復(fù)合雜合子。其妹突變類(lèi)型與先證者完全相同，其母僅在第14外顯子存在雜合的終止密碼突變，為該病的攜帶者，其父僅在第4外顯子存在雜合的錯(cuò)義突變，也為雜合子；第14外顯子的PCR產(chǎn)物經(jīng)XspI酶切后，正常對(duì)照組切出28bp、120bp、399bp3條帶，而患者和攜帶者的母親均切出28bp、120bp、148bp和399bp4條帶；用ARMS特異引物擴(kuò)增后，正常對(duì)照組均擴(kuò)增陰性，而患者及攜帶者均擴(kuò)增陽(yáng)性；蛋白質(zhì)二級(jí)、三級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)結(jié)果顯示：c ．1567T〉G變異導(dǎo)致終止密碼（TAG）突變?yōu)楣劝彼幔℅AG），使多肽鏈延長(zhǎng)了92個(gè)氨基酸殘基，導(dǎo)致蛋白質(zhì)二、三級(jí)結(jié)構(gòu)發(fā)生明顯改變，而正常對(duì)照無(wú)此變化。酶活性測(cè)定的結(jié)果顯示：患者的GALNS酶活性僅為8．3nmol／17h／mgpr，明顯低于正常值（正常參考值為41．9～92．1nmol／17h，／mgpr）。結(jié)論c．1567T?